کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)
به روز رسانی شده در ۱۴۰۳/۷/۲۲ زمان مطالعه 10 دقیقه
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLCs) از فاز متحرک مایع برای جداسازی اجزای یک مخلوط استفاده می کند. اجزاء در یک حلال حل شده و تحت فشار بالا مجبور به جریان در یک ستون کروماتوگرافی می شوند. در ستون، مخلوط به اجزای آن تجزیه می شود. اجزا از طریق آشکارساز جریان می یابند و کروماتوگرام تولید می شود. اکثر HPLC ها از پمپ های فشار بالا برای وادار کردن حلال ها از طریق بسترهای ثابت استفاده می کنند. پمپ های ایزوکراتیک از ترکیب فاز متحرک ثابت برای شستشوی ترکیبات استفاده می کنند. در مقابل، پمپ های گرادیان قدرت حلال آلی را برای شستشوی ترکیبات مختلف تغییر می دهند. پمپ های دارای کنترل جریان برای HPLC هایی که گرادیان ها را به صورت خودکار ارائه می کنند مناسب هستند. مشخصاتی مانند سرعت جریان، حداکثر فشار پمپ و دقت پمپ در دستگاه‌ها متفاوت است. در سیستم های ساده نمونه با شیر تزریق معرفی می شود. HPLC های پیچیده تر از یک نمونه گیری خودکار با یک ریزپردازنده استفاده می کنند.
نمایش تمام سازندگان کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC).
برنامه های کاربردی
HPLC ها از چندین روش تشخیص استفاده می کنند. آشکارسازهای فرابنفش (UV) توانایی نمونه را برای جذب نور در یک یا چند طول موج اندازه گیری می کنند. آشکارسازهای پراکندگی نور پساب ستون را نبولایی می کنند، حلال را تبخیر می کنند و سپس قطرات را در سلول پراکنده نور تشخیص می دهند. آشکارسازهای الکتروشیمیایی جریان حاصل از واکنش اکسیداسیون/کاهش یک آنالیت را در یک الکترود مناسب اندازه گیری می کنند. آشکارسازهای رادیوشیمیایی از تریتیوم یا کربن 14 برای تشخیص فلورسانس مرتبط با یونیزاسیون ذرات بتا استفاده می کنند. آشکارسازهای طیف سنجی جرمی یک نمونه را یونیزه می کنند و از یک تحلیلگر جرمی برای تشخیص جریان یون استفاده می کنند. آشکارسازهای تشدید مغناطیسی هسته‌ای، هسته‌هایی را که بین قطب‌های یک آهنربای قوی قرار می‌گیرند، تابش می‌کنند. تابش جذب می شود، هسته های موازی وارد حالت انرژی بالاتری می شوند و هر اتم طیفی خاص به مکان و ترکیب شیمیایی خود تولید می کند. برخی از HPLC ها تغییر در ضریب شکست پساب ستونی را که از سلول جریان عبور می کند اندازه گیری می کنند. برخی دیگر فلورسانس را تشخیص می‌دهند که وقتی ترکیبات با انرژی طول موج کوتاه‌تر برانگیخته می‌شوند و تابش طول موج بالاتری ساطع می‌کنند، رخ می‌دهد.
ویژگی ها
HPLC ها از نظر ویژگی های کلی، گزینه های نمایش و گزینه های رابط متفاوت هستند.
ویژگی های عمومی عبارتند از:
خود کالیبراسیون
تشخیص خودآزمایی
ذخیره سازی داده ها
قابلیت برنامه ریزی
دستگاه هایی با کروماتوگراف داخلی و نرم افزار کاربردی معمولاً در دسترس هستند. برخی از HPLC ها برای دماهای شدید مناسب هستند. برخی دیگر یک ولتاژ آنالوگ، جریان آنالوگ، فرکانس یا پالس را تولید می کنند.
مثالها عبارتند از:
مدولاسیون دامنه (AM)
مدولاسیون فرکانس (FM)
مدولاسیون عرض پالس (PWN)
امواج سینوسی،
قطارهای پالس
دستگاه های آنالوگ معمولاً شامل یک متر آنالوگ و یک پنل جلویی با کلیدها و دستگیره ها هستند. دستگاه های دیجیتال اغلب یک رابط کامپیوتری سریال یا موازی و یک نمایشگر ویدیویی ارائه می دهند. پروتکل های سریال عبارتند از گذرگاه سریال جهانی (UBS)، RS232، RS422 و RS485.
منبع