شمارنده های سلولی خودکار

شمارنده های سلولی خودکار برای شمارش سلول های زنده یا مرده موجود در یک کشت استفاده می شود. آنها ممکن است غلظت سلولی را قبل از عبور سلولی تخمین بزنند یا بقای سلول را پس از درمان دارویی ارزیابی کنند. 

عملیات

شمارنده های سلولی از طریق روش "منطقه حسگر الکتریکی" (که به عنوان شمارنده ذرات شناخته می شوند) امپدانس الکتریکی را درگیر می کنند. آنها تصویربرداری مستقیم را، چه روی یک اسلاید یکبار مصرف، چه در یک محفظه جریان (همچنین به عنوان QBC) یا فلوسیتومتری ادغام می کنند. زنده ماندن سلول با مکانیسم های خودکار متکی به رویکردهای مبتنی بر تصویربرداری با استفاده از آبی تریپان به عنوان یک عنصر رنگ آمیزی قابل تشخیص است. این لکه مانند هماسیتومتری سنتی به شناسایی سلول های مرده کمک می کند. امپدانس الکتریکی که به عنوان شمارش کولتر شناخته می‌شود، قادر به تشخیص سلول‌های زنده از سلول‌های مرده نیست، مگر با در نظر گرفتن اندازه آنها.

نمایش تمام سازندگان شمارنده های سلولی خودکار

شمارنده‌های خودکار در آزمایشگاه‌های پزشکی و تحقیقاتی مستقر می‌شوند و با عبور یک نمونه سلولی بارگذاری شده روی عنصر از طریق یک لوله عمل می‌کنند. این ابزار را قادر می‌سازد تا تعداد سلول‌هایی را که در لوله حرکت می‌کنند از طریق حسگرهای امپدانس نوری یا الکتریکی اسکن کند. واحدها مقادیر سلولی را تعیین می کنند یا میزان زنده ماندن رده های سلولی کشت شده را که تحت تحقیق قرار گرفته اند با استفاده از نمونه های خون یا ادرار اندازه گیری می کنند. سیستم های تخصصی از تجزیه و تحلیل ادرار یا خون پشتیبانی می کنند. جدا از تمایز بین سلول‌های زنده و مرده، مکانیسم‌های خودکار از نظر ویژگی‌هایی مانند الزامات اندازه نمونه، انتخاب انواع سلول‌های مورد تجزیه و تحلیل و قابلیت‌های مدیریت داده‌ها متفاوت است. تشخیص نوری امکان شمارش متفاوت انواع گلبول های سفید را فراهم می کند.

تجهیزات اتوماتیک گرانتر از نسخه های دستی هستند، اما مزایای عملکردی واضحی از جمله:

• سهولت استفاده

• نتایج سریع

• دقت خروجی پیشرفته

• توانایی انجام تست های متعدد

اصل کولتر

اولین ابزار خودکار برخاسته از اصل کولتر بود که توسط مخترع والاس اچ. کولتر ساخته شد. پس از جنگ جهانی دوم، او توسط چندین شرکت الکترونیک مشغول به کار شد و یک آزمایشگاه خانگی داشت که در آن روی پروژه های مختلف کار می کرد. در حین انجام آزمایشات نوری و الکترونیکی، او شروع به استفاده از خون به دلیل ویسکوزیته آن کرد که با رنگ قابل مقایسه است. این منجر به کشف روشی برای شمارش سلول ها از طریق امپدانس الکترونیکی شد که متعاقباً به عنوان اصل کولتر شناخته شد.

این اصل نشان داد که خون ضد انعقاد، زمانی که با استفاده از سالین ایزوتونیک رقیق می‌شود و سپس از طریق امپدانس الکترونیکی آزمایش می‌شود، تخمین سلول‌های خون انسان را تسهیل می‌کند. دستگاه هایی که از این اصل استفاده می کنند موفقیت سریعی را در بازار هماتولوژی تجربه کردند. اولین استفاده تجاری از مفهوم در هماتولوژی در سال 1954 هنگامی که شمارنده Coulter Model A که توسط والاس و برادرش جوزف ساخته شده بود، عرضه شد.

انواع

نسخه های دستی شامل هماسیتومترهایی است که شامل لام های شیشه ای حکاکی شده با شبکه های شمارش می شود. سیستم های خودکار به سه دسته اصلی تقسیم می شوند:

شمارنده امپدانس (ذرات).

این واحدها با معلق کردن سلول ها در محلول الکترولیت و عبور جریان الکتریکی از مخلوط کار می کنند. همانطور که سلول ها از طریق سوراخ در ساختار حرکت می کنند، یک هدایت الکتریکی مهار شده بین پایانه ها یک پالس ایجاد می کند. یک معرف لیتیک در محلول خون موجود است که تنها گلبول های سفید (WBC) و پلاکت ها را دست نخورده می بیند. در این مرحله، محلول از یک آشکارساز دوم عبور می‌کند و شمارش گلبول‌های قرمز (RBC)، WBC و پلاکت‌ها را ممکن می‌سازد. سنبله‌های امپدانس کوچک‌تر تولید شده توسط پلاکت‌ها به دلیل حجم سلولی کمتر، امکان جداسازی پلاکت‌ها از تعداد WBC را فراهم می‌کند.

تصویربرداری مستقیم (QBC)

ماشین هایی از این نوع با قرار دادن خون در لوله ای حاوی رنگ پودری عمل می کنند. در این مرحله یک شناور به مخلوط اضافه می شود و متعاقبا یک کلاهک برای پوشاندن انتهای آن قرار می گیرد. سپس لوله از یک سانتریفیوژ عبور می کند که به سرعت در حال چرخش است و باعث می شود سلول ها بر اساس تراکم آنها ته نشین شوند. قرار گرفتن شناور در داخل لوله مویین باعث انبساط شدید پوشش بافی می شود در حالی که رنگ به رنگ آمیزی سلول ها کمک می کند. سپس این ابزار با استفاده از نور UV سلول ها را اسکن می کند. شدت فلورسانس قابل انتساب به هر لایه را اندازه گیری می کند و سپس ضخامت تخمین زده شده را به مقادیر عددی تبدیل می کند. ماشین های QBC شامل لایه هایی هستند که از موارد زیر تشکیل شده اند: 

• پلاکت ها

• گرانولوسیت ها

• پلاسما

• گلبول های قرمز

• مونوسیت ها و لنفوسیت ها

فلوسیتومتری

موارد فلوسیتومتری با قرار دادن سلول ها در معرض پرتوهای لیزر به منظور اندازه گیری آنها عمل می کنند. عبور آنها نور را پراکنده می کند و الگوهای خاصی در ارتباط با انواع سلول های فردی ایجاد می کند. این دستگاه حاوی آشکارسازهایی برای یادداشت این الگوها برای تعیین کمیت تعداد سلول ها است.

انتخاب

مدل های مبتنی بر نوری امکان تمایز بین سلول های زنده و مرده را فراهم می کنند. آنها همچنین برای فعالیت هایی که نیاز به شناسایی گلبول های سفید خون دارند ترجیح داده می شوند. سیستم های تصویربرداری مستقیم/QBC عملکرد سریع و ارزانی را ارائه می دهند. آنها برای کار با خون طبیعی پیکربندی شده اند و توانایی تشخیص لنفوسیت ها از مونوسیت ها را ندارند. واحدهای فلوسیتومتری، اگرچه گران تر هستند، اما قادر به جداسازی پلاکت ها از WBC و انجام شمارش رتیکولوسیت ها و شاخص های گلبول قرمز هستند.

منبع

globalspec